Introducere 3

Consideratii teoretice 4

1 Mediidemigrare¸si mecanisme de separare în electroforez˘a 5

1.1 M˘arimi caracteristice electroforezei . . . . . . . . . . . . . . . 5

1.2 Electroforeza înmediu liber . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10

1.3 Electroforeza în medii stabilizante . . . . . . . . . . . . . . . . 12

1.3.1 Hârtia camediu demigrare . . . . . . . . . . . . . . . 13

1.3.2 Acetatul de celuloz˘a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14

1.3.3 Gelul de poliacrilamid˘a . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15

1.3.4 Gelul de amidon . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

1.3.5 Gelul de agaroz˘a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19

1.3.6 Geluri compozite de poliacrilamid˘a - agaroz˘a . . . . . . 22

1.4 Electroforeza de afinitate . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23

1.5 Imunodifuzia ¸si imunoelectroforeza . . . . . . . . . . . . . . . 24

1.6 Focalizarea izoelectric˘a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25

1.7 Izotacoforeza . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27

1.8 Electroforeza bidimensional˘a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28

1.9 Electroforeza capilar˘a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29

2 Separarea proteinelor prin electroforez˘a 34

2.1 Electroforeza proteinelor plasmatice . . . . . . . . . . . . . . . 37

2.2 Electroforeza hemoglobinei . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 42

Contributii originale 51

3 Studiul electroforezei proteinelor serice - aplica¸tii clinice 52

3.1 Studiul influen¸teimediului demigrare asupra determin˘arii electroforetice

a albuminei serice umane . . . . . . . . . . . . . . . 52

1

3.2 Evaluare comparativ˘a a analizei proteinelor serice prin electroforeza

în gel de agaroz˘a ¸si electroforeza pe hârtie . . . . . . 59

3.3 Influen¸ta timpului de migrare asupra l˘argimii benzii corespunz

˘atoare albuminei serice separat˘a prin electroforeza în gel de

agaroz˘a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 68

3.4 Eviden¸tierea componentelormonoclonale prin electroforeza proteinelor

serice în gel de agaroz˘a . . . . . . . . . . . . . . . . . 71

3.5 Varia¸tii patologice ale frac¸tiunilor proteice ob¸tinute în urma

electroforezei în gel de agaroz˘a . . . . . . . . . . . . . . . . . . 76

4 Studiul electroforezei hemoglobinei - aplica¸tii clinice 80

4.1 Determinarea rela¸tiei dintre glucozamedie din sânge ¸si hemoglobina

glicozilat˘a HbA1c separat˘a prin electroforez˘a . . . . . . . . . . 80

4.2 Depistarea cazurilor de betta talasemie utilizând electroforeza

hemoglobinei pe gel de agaroz˘a în tampon alcalin . . . . . . . 86

4.3 Efectul fumatului asupra concentra¸tiei carboxihemoglobinei la

persoanele cu betta talasemie minor˘a . . . . . . . . . . . . . . 90

4.4 Influen¸ta pH-ului asupra autooxid˘arii oxihemoglobinei . . . . . 97

4.5 Influen¸ta pH-ului sanguin asupra concentra¸tiei methemoglobinei108

Concluzii generale 111

5 Anexe 114

5.1 Anexa 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 114

5.2 Anexa 2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 114

5.3 Anexa 3 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 115

5.4 Anexa 4 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 118

5.5 Anexa 5 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 119

5.6 Anexa 6 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 139

5.7 Anexa 7 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 145

Bibliografie 155

2